四通道超聲波粉碎機,DH4S-2000是一種利用強超聲在液體中產生空化效應酒精報警器,對物質進行超聲處理的多功能、多用途的儀器,能用于多種動植物細胞、病毒細胞的破碎,同時可用來乳化、分離、勻化、提取、消泡、清洗及加速化學反應等等。被廣泛應用于生物化學、微生物學、藥物化學、表面化學、物理學、動物學等領域。創新型定制4通道變幅桿探頭,同時處理4個樣品,大大提升了實驗效率。
◆用于動植物細胞、細菌、芽孢或組織的粉碎,從細胞中提取蛋白質以及進行病毒、疫苗的科學培養實驗。
◆加速化學、物理學等的反應速度和加速液體脫氣。
◆原油稀釋、油水乳化、加速脫晶,玻璃均漿等進行的科研分析。
◆分散稀土煤氣檢測儀,各類無機礦物質,以及配制近納米百分之一的乳膠體均化混合物等。
◆模具微孔,盲孔的快速強力高精洗液。
實驗目的
1、了解超聲細胞破碎的基本原理
2、掌握超聲細胞破碎的基本技術
實驗原理
強聲波作用溶液時,氣泡產生、長大和破碎的空化現象有關,空化現象引起的沖擊波和剪刀力使細胞裂解。
材料和試劑
細菌10ml、燒杯、刨冰、75%酒精棉球。
探頭型號大小
破碎細胞容量
2mm
150ul-5ml
3mm
200ul-10ml
6mm
10ml-50ml
10mm
50ml-150ml
型號
DH4S-2000
頻率
20-25KHz自動跟蹤
功率
2000W
隨機變幅桿
Φ6*4支
可選配變幅桿
Φ3*4支(主機功率為650W-DH4S-650)
破碎容量
10-150ml*4個樣品
溫度報警范圍
0-100℃
保護功能
超溫、超功、超時
占空比
1-99%
電源
220/110V 50Hz/60Hz
電源機箱尺寸
400×280×220mm
凈重
12.1kg
主機+換能器重量
14kg
外包裝尺寸
534×295×435mm
超聲波發生器
一臺
振動系統(換能器組件)
一套(φ6mm*4支)
電源線
一根
專用扳手(用于拆卸變幅桿)
一套
保險絲
8A 、5A各2個
使用說明書
一份
合格證
一張
保修卡
一份
細胞破碎的方法:
一、機械破碎法:是指利用搗碎機、研磨器或勻漿器 等將細胞破碎開來 。
1. 高速組織搗碎:將材料配成稀糊狀液,放置于筒內約1/3體積,蓋緊筒蓋,將調速器先撥至最慢處,開動開關后,逐步加速至所需速度。此法適用于動物內臟組織、植物肉質種子等。
2. 玻璃勻漿器勻漿:先將剪碎的組織置于管中,再套入研桿來回研磨,上下移動,即可將細胞研碎,此法細胞破碎程度比高速組織搗碎機為高酒精探頭酒精探頭,適用于量少和動物臟器組織。
二、物理破碎法:指利用溫度差、壓力差或超聲波等將細胞破碎開來。
1:用一定功率的超聲波處理細胞懸液,使細胞急劇震蕩破裂(借助超聲的震動力破碎細胞壁和細胞器)。
機制:可能與強聲波作用溶液時,氣泡產生、長大和破碎的空化現象有關,空化現象引起的沖擊波和剪刀力使細胞裂解。
超聲波破碎的效率取決于聲頻、聲能、處理時間、細胞濃度和細胞類型等。(使用時注意降溫,防止過熱)。
2. 高壓破碎:細胞懸浮液從高壓室的環狀隙噴射到靜止的撞擊環上酒精探頭,被迫改變方向經出口管流出。此過程中細胞經歷了高速造成的剪切的碰撞及高壓到常壓的變化,從而破碎釋放內含物。
這是一種溫和的、徹底破碎細胞的較理想的方法。
3. 反復凍融法:將細胞在-20度以下冰凍,室溫融解,反復幾次,由于細胞內冰粒形成和剩余細胞液的鹽濃度增高引起溶脹,使細胞結構破碎。
三、化學破碎法:指利用甲醛、丙酮等有機溶劑或表面活性劑作用于細胞膜,使細胞膜的結構遭到破壞或透性發生改變 。
有些動物細胞,例如腫瘤細胞可采用十二烷基磺酸鈉(SDS)、去氧膽酸鈉等細胞膜破壞。濃度一般為1mg/ml。
四、酶學破碎法 :選用合適的酶,使細胞壁遭到破壞,進而在低滲溶液中將原生質體破碎開來。
細菌細胞壁較厚,可采用溶菌酶處理效果更好。
裂解液標準配方: :50mM Tris-HCl(pH8.5~9.0), 2mM EDTA, 100mM NaCl, 0.5% Triton X-100, 1mg/ml溶菌酶。(溶菌酶在這個pH范圍內比較好發揮作用) 。
綜合敘述:無論用哪一種方法破碎組織細胞,都會使細胞內蛋白質或核酸水解酶釋放到溶液中,使大分子生物降解,導致天然物質量的減少,加入二異丙基氟磷酸(DFP)可以抑制或減慢自溶作用;加入碘乙酸可以抑制那些活性中心需要有疏基的蛋白水解酶的活性,加入苯甲磺酰氟化物(PMSF)也能清除蛋白水解酶活力,但不是全部,而且應該在破碎的同時多加幾次;另外,還可通過選擇pH、溫度或離子強度等,使這些條件都要適合于目的物質的提取。
使用前注意事項:
1.根據所處理的樣本體積選擇適當探頭,使用前后均須用酒精棉球擦洗探頭,換探頭須剛專用扳手更換;
2.AMPLITUDE旋鈕打開時,探頭不得在空氣中暴露,特殊情況下(測試探頭)不應超過10秒;
3.使用前準備好冰盒,樣品處理時必須置于冰浴中,樣品濃度不可過大。
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